细胞与基因治疗是利用基因治疗载体将外源的治疗性基因转导至细胞,再通过外源基因的转录和翻译,改变细胞原有基因表达以治疗疾病的方法。作为继小分子、大分子靶向疗法之后的新一代精准疗法,细胞与基因治疗为肿瘤、罕见病、慢性病及其他难治性疾病提供了新的治疗理念和手段。腺病毒、腺相关病毒和逆转录病毒等病毒载体是遗传物质的有效递送系统,可用于细胞与基因治疗和疫苗生产。慢病毒可用于新型细胞免疫疗法(基因修饰细胞疗法),如CAR-T细胞疗法的遗传信息传递。这些创新方法将成为新一代重疾疗法的重要一环。
CGT技术流程
以CAR-T生产为例,其具体过程涉及生产质粒、病毒、细胞:
(1)质粒生产一般需要2周时间。作为基因的载体,在CGT中常作为基因表达、基因编辑工具(如CRISPR-Cas 系列)、病毒生产的基础平台;
(2)病毒生产一般需要2-3周时间。作为CGT常用的基因传递工具,它既可以作为基因治疗的最终产品,直接用于在体治疗,也可以作为中间载体将目的基因递送至体外培养的细胞。
(3) 细胞扩张培养一般需要2周时间。作为细胞治疗的最终产品,通常是从人体细胞分离后,经过基因改造、扩增而得到。
带有病毒的工具细胞培养主要有贴壁培养和悬浮培养,贴壁培养是传统主流方法,但悬浮培养可以实现更高密度的细胞生长,即生产病毒成本更低,正逐渐成为主流。与贴壁细胞相比,悬浮培养可以更方便地放大生产规模,并无需繁琐的细胞分离步骤。赛科成现有摆床生物反应器、玻璃生物反应器和不锈钢生物反应器都可用于促进悬浮细胞的生长。
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