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流行性感冒作为一种常见的疾病，至今不能被有效控制。尤其是在流感季节，大量人群需要接种流感疫苗以预防病毒感染。
目前流感疫苗生产的主要原材料是鸡胚，将病毒接种在十日龄孵化过程中的鸡胚尿囊腔里进行病毒繁殖。在养殖行业高度产业化的今天，用鸡胚来生产疫苗可以使成本压到很低。但用鸡胚生产最重要的问题是生产周期长，也无法应对大流行（pandemic）的爆发。所以作为一种公卫战略，疫苗企业也在开发细胞基质流感疫苗。其中，犬肾细胞MDCK以其培养容易、增殖快的特点，再加上α-2,6-和α-2,3-连接的唾液酸受体都暴露在MDCK细胞上[1]，并且它可以高效支持人和禽流感病毒的复制。因此，MDCK细胞成为适用于流感病毒疫苗生产的重要细胞系之一[2]。
采用生物反应器大规模动物细胞生产流感疫苗，是将病毒接种至种子细胞，并在生物反应器上大规模进行病毒繁殖以实现流感疫苗的规模化生产。MDCK是上皮样细胞，通常是以贴壁方式生长，近年也有悬浮驯化培养工艺见于报道[3-4]。贴壁培养的规模化培养有几种方式可以选择，一种是从一种培养容器扩大到更大规模的培养容器，如从培养瓶扩大到细胞工厂，但这样放大规模有限；另一种是利用微载体[5]或片状载体[6]来提供超大的粘附面积，在反应器中实现“半悬浮”培养。全悬浮培养是MDCK细胞在无血清培养基中细胞在非贴壁状态下悬浮培养。武汉赛科成提供各类生物反应器及片状载体，支持不同规模及工艺路线下疫苗的生产。
细胞基质流感病毒灭活疫苗免疫原性和安全性方面均优于鸡胚基质流感疫苗，对鸡蛋过敏的人群也可以接种。因此，细胞基质流感疫苗是未来流感疫苗的发展方向，也是有效应对禽／人流感大暴发流行的最快捷、高效的疫苗生产方式。在未来，我们期待通过生物反应器的广泛应用和培养体系的进一步优化，有望能实现更高密度、更大规模下的疫苗制备工艺，实现中国本土疫苗产业的革新气象。
参考文献：
[1] ki Y,Kawaoka Y.Enhanced expression of analpha2,6-linked sialic acid onMDCKcellsimproves isolation of human influenza viruses and evaluation of their sensitivity to a neuraminidase inhibitor[J].J Clin Microbiol, 2005,43(8): 4139-4146.
[2] Tree JA, Richardson C, Fooks AR, et al. Comparison of large-scale mammalian cell culture systems with egg culture for the production of influenza virus A vaccine strains. Vaccine, 2001, 19: 3444−3450.
[3] 武毓姝,孙伟洋,赵梦琳,等. B型流感疫苗候选株在MDCK悬浮细胞上培养工艺优化研究[J]. 病毒学报,2024,40(2):283-292. DOI:10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004464.
[4] 李乐凯,吴业红,徐军,迟祥,李爽,席莉,张雪梅,郭占龙.生物反应器高密度无血清培养全悬浮MDCK细胞和流感病毒工艺的建立[J].中国生物制品学杂志,2022,35(9):1082-1089.
[5] 王石磊. (2012). 基于MDCK细胞培养的流感疫苗研究. (Doctoral dissertation, 上海交通大学).
[6] 马春英,王美皓. 动物细胞培养基质片状载体的研究及应用进展[J]. 中国生物制品学杂志,2023,36(6):731-736,741.
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